期刊简介

               《国外医学妇产科学分册》是国家卫生部主管的《国外医学》系列期刊之一,是由天津市医学科学技术信息研究所主办,天津医科大学总医院、天津市中心妇产科医院、国家人口计生委科研所、浙江大学附属妇产科医院、天津武警医学院附属武警医院、天津市第一中心医院联合承办的以报道国外妇产科学领域最新研究动态、新进展、新技术和新经验的国家级医学信息刊物。                

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  • 杂志名称:国际妇产科学杂志
  • 主管单位:中华人民共和国卫生部
  • 主办单位:天津市医学科学技术信息研究所
  • 国际刊号:1674-1870
  • 国内刊号:12-1399/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:1990年获得卫生部《国外医学》系列期刊评比一等奖期刊收录:CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏
国际妇产科学杂志2014年第04期

稳定沉默STAT3的HPV16阳性宫颈癌细胞株的建立

沈青丽;何耀娟;郭凯敏;叶明;林仲秋

关键词:宫颈肿瘤, 癌, DNA结合蛋白质类, 人乳头瘤病毒16, RNA干扰, 逆转录病毒科
摘要:目的:建立针对人信号传导与转录激活因子3(STAT3)的小发夹RNA(shRNA)逆转录病毒表达载体,建立稳定感染的人乳头瘤病毒16(HPV16)阳性宫颈癌细胞系,以进一步探讨STAT3在HPV16阳性宫颈癌发生和发展中的作用。方法:设计合成3条靶向STAT3基因的小干扰RNA(siRNA),从中选择1条具有佳干扰效果的siRNA,构建STAT3-shRNA载体pSUPERretro-puro-STAT3,用293FT细胞包装质粒产生STAT3 shRNA逆转录病毒,感染HPV16阳性的宫颈癌细胞株SiHa和CaSki细胞后,通过嘌呤霉素筛选2周,约3 d传代1次,建立稳定细胞株,稳定沉默STAT3的细胞株命名为SiHa/STAT3-sh和CaSki/STAT3-sh。通过实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹(Western blotting)分别从mRNA和蛋白水平检测STAT3的表达量。结果:经RT-PCR和Western blotting实验证实,在SiHa/STAT3-sh和CaSki/STAT3-sh细胞中,STAT3 mRNA的抑制率达99%以上(P<0.01),STAT3总蛋白抑制率达70%以上(P<0.01),磷酸化STAT3蛋白的抑制率达78%以上(P<0.01)。结论:稳定沉默STAT3的HPV16阳性宫颈癌细胞株建立成功。